Определение эстрогенов в моче

Предварительно
авторами было произведено исследование меры экстракции фенолстероидов из водных
растворов с различным содержанием эстрона, эстрадиола и эстриола в последних.
Мера экстракции для отдельных стероидных соединений соответственно в среднем
составляла 88-85, 93-80 и 87%. Указанные величины были получены после
растворения различных количеств  эстрона,
эстрадиола и эстриола в 500 мл воды с последующей обработкой в течение 1 часа
75 мл концентрированной соляной кислоты (имитация кислотного гидролиза). После
охлаждения смеси эстрогены трижды экстрагировались 200 мл эфира. Извлечение
эфирной фракции производилось троекратной обработкой 100 мл 1 н. раствора
гидроокиси натрия. После нейтрализации стероиды вновь экстрагировались эфиром и
высушивались досуха. Сухой остаток обрабатывался в течение 1 часа при
температуре 60° 1 мл уксусного ангидрида и 1 мл пиридина. Ацетилированные таким
образом фенолстероиды высушивались в токе азота, затем растворялись в небольшом
количестве толуола и вводились в хроматограф.

Обнаружение
эстрогенов в моче у женщин в преовуляторной фазе менструального цикла
производилось принципиально таким же образом, что и в водных растворах
эстрогенов, как было описано выше, за исключением того, что первый эфирный
экстракт дополнительно промывался бикарбонатом натрия.

Методика выделения эстрогенов из мочи нормально менструирующих женщин, беременных
и детей, осуществлявшаяся нами , заключается в следующем.  Гидролиз мочи производится путем добавления 0
2 объема концентрированной соляной кислоты и кипячением в течение 30 минут.
Эфирные экстракты сливаются вместе и дважды промываются 0,1 объема
двууглекислого натрия, один раз таким же объемом 10% раствора углекислого
натрия и дважды таким же количеством дистиллированной воды. Все водные фазы
отбрасываются. Далее, эфирный экстракт выпаривается досуха и сухой остаток
растворяется в 45 мл четыреххлористого углерода и 5 мл эфира. Экстракция
фенолстероидов производится  раствором
(четырежды, по одному объему).

Оставить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *