Образование триметилсилиловых эфиров

Patti
с сотрудниками (1963) для отделения кортикостероидов от 17-кетостероидов и для
очистки экстрактов предпочитают пользоваться колонками с флоризилом и окисью
алюминия. Авторы полагают, что в этих целях колоночная хроматография
предпочтительнее хроматографии на бумаге.

Мы
в указанных целях предпочитаем пользоваться хроматографией в тонких слоях
адсорбентов на стеклянных пластинках. Это обусловлено теми обстоятельствами,
что применение тонкослойной хроматографии для предварительной обработки
биологического материала и для фракционирования стероидов дает целый ряд
преимуществ по сравнению с другими методами исследования, отличаясь высокой
чувствительностью (до 0,1-0,01 мкг), возможностью обрабатывать пластинки
агрессивными проявителями и быстротой производства анализа. Имеют место и
некоторые другие соображения, о чем будет сказано ниже.

При
выполнении этой части работы нами применялся силикагель отечественной марки КСК,
который размалывался и просеивался через сито с отверстиями величиной 0,07 мм.
Далее силикагель заливали концентрированной соляной кислотой на 4 дня для
освобождения от примесей железа, промывали дистиллированной водой до отсутствия
ионов хлора, после чего производили взбалтывание, декантацию и, наконец,
высушивание его при температуре 120 в течение 48 часов.

Хроматографирование
производилось на стеклянных пластинках, на которые наносился слой адсорбента
равномерной толщины. После хроматографирования пластинка высушивалась,
просматривалась в УФ свете с длиной волн 253,7 и 360,0 ммк и при необходимости
окрашивалась по одной из общепринятых методик.

При просматривании стероидов в УФ свете мы учитывали данные Patti с
сотрудниками (1963) о том, что в этих условиях может быть вызвана молекулярная
альтерация, в частности переход кортизола в кортизон. Такого же рода изменения
с понижением количества кортизола в нанесенных стандартах и экстрактах мочи
были отмечены указанными авторами в системе растворителей толуол-пропилен-гликоль
и в системе ЕВ Eberlein и Bongiovanni (1955).

Оставить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *