Обнаружение эстрогенов в моче у женщин

Щелочные
экстракты соединяются и добавлением серной кислоты доводятся до рН 5, после
чего экстрагируются эфиром (таким же объемом) и вновь промываются раствором
двууглекислого и углекислого натрия, а также водой. Эфирный экстракт снова
выпаривается досуха, растворяется в смеси метанол-хлороформ или этанол-хлороформ
1 :1 и наносится на пластинку с силикагелем.

Тонкослойная
хроматография проводится на стеклянных пластинках размером 13 X 18 см. Работа
производилась либо в закрепленном, либо в незакрепленном слое адсорбента. В
первом случае на каждые 3 г силикагеля добавляли до 0,5 г гипса.

Пробы
на пластинку обычно наносили линейно и после подсушивания производили
двукратную разгонку в системе бензол — метанол 9:1. Для разделения эстрогенов
до отдельных стероидных с единений использовались также системы растворителей
бензол — этанол 9:1 и эфир — гексан 6:4. 3

После
ацетилирования в хроматограф вводилась либо вся фракция фенолстероидов (для
окончательного разделения и одновременного количественного определения), либо
отдельные эстрогены. В последнем случае (первый, естественно, более
предпочтителен) газо-жидкостная хроматография использовалась лишь для
количественного определения эстрогенов в вводимой пробе.

Анализ
производился на хроматографе с ионизационным аргоновым детектором и стеклянными
колонками, наполненными 1-5% , которые наносились на повторно промытые кислотой
и силанизированные хромосорб. Температура колонки была 220-240°, детектора
250°. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определению метаболитов прогестерона — прегнандиола, прегнантриола и
прегнантриолона методом газо-жидкостной хроматографии посвящено несколько работ.
Достаточно исчерпывающие данные по этому вопросу приведены в исследовании
Raman, Avramov, McNiven и Dorfman (1965). В этом исследовании разработана
методика качественного и количественного определения всех трех перечисленных
выше стероидных соединений в моче.

Оставить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *